概要
日本薬局方「遺伝子解析による微生物の迅速同定法」に準拠し、単離菌株からDNAを抽出後、微生物の特定遺伝子領域をPCRにて増幅します。サイクルシーケンス反応を行い、DNAシーケンサー(Applied Biosystems 3730)を用いて読み取った塩基配列情報を用いて相同性検索を行い、微生物種を同定します。
| サービス名 | 解析対象遺伝子 |
| 細菌同定 | 16S rRNA(500bp)*1 |
| 真菌同定 | ITS1遺伝子*2 |
| 菌種不明の場合 | 16S rRNA(500bp)*1 及び ITS1遺伝子*2 |
*1 16S rRNA の高度可変領域の一部(上流約500bp)
*2 18S rRNA と5.8S rRNA 間のスペーサー領域(ITS1)の遺伝子配列
解析の流れ
1 寒天培地プレートから独立コロニーをピックします。
2 加熱処理後した菌液にプライマーセット*3を添加し、ダイレクトPCRによって解析対象の遺伝子領域を増幅します。
3 PCR産物を精製し、シークエンシング反応を行い、DNAオートシーケンサーで塩基配列(両鎖解析)を読み取ります。
4 得られた塩基配列を相同性(BLAST)検索によって国際塩基配列データベースと照合を行い、相同性の高い菌種のリストを作成します。
5 国際塩基配列データベースと照合した結果、相同性の高い上位100件の菌種の系統分類を行います。
6 得られた塩基配列とその類縁菌種の塩基配列を用い簡易的に系統樹を作成します。
*3 プライマーセット情報
対象生物種 |
プライマー名 |
配列 |
| 細菌 | 10F | 5'-GTTTGATCCTGGCTCA- 3' |
| 800R | 5'-TACCAGGGTATCTAATCC- 3' | |
| 真菌 | ITS1F | 5'-GTAACAAGGT(T/C)TCCGT- 3' |
| ITS1R | 5'-CGTTCTTCATCGATG- 3' |
標準価格・標準納期*4
- ■ 通常納期の場合
| サービス名 | 標準価格 | 標準納期 |
| 細菌簡易同定 | 1菌株目:45,000円(47,250円) 2菌株目以降、1解析当たり 15,000円(15,750円) |
サンプル受領後約1週間~ |
| 真菌簡易同定 | 1菌株目:45,000円(47,250円) 2菌株目以降、1解析当たり 15,000円(15,750円) |
サンプル受領後約1週間~ |
| 菌種不明の場合の簡易同定 | 1菌株目:60,000円(63,000円) 2菌株目以降、1解析当たり 30,000円(31,500円) |
サンプル受領後約2週間~ |
- ■ 特急納期の場合(お急ぎの場合はこちら)
| サービス名 | 標準価格 | 標準納期 |
| 【特急】細菌簡易同定 | 1菌株目:60,000円(63,000円) 2菌株目以降、1解析当たり 30,000円(31,500円) |
サンプル受領後 最短3営業日~ |
| 【特急】真菌簡易同定 | 1菌株目:60,000円(63,000円) 2菌株目以降、1解析当たり 30,000円(31,500円) |
サンプル受領後 最短3営業日~ |
| 【特急】菌種不明の場合の簡易同定 | 1菌株目:75,000円(78,750円) 2菌株目以降、1解析当たり 45,000円(47,250円) |
サンプル受領後 最短3営業日~ |
- ■ オプション解析
| サービス名 | 内容 | 標準価格 |
| 16S rRNA全長配列解析 | 16S rRNAの全長配列を解析し、ご報告します。 | 1菌株当たり55,000円(税込み57,750円)となります。 |
| カスタム領域配列解析 | 16S rRNA、ITS1遺伝子領域以外の配列解析も、お客様のご要望に応じて対応いたします。 | お問い合わせください |
| 16S rDNA細菌叢解析 | 次世代シーケンサーを用いた16S rDNAのシーケンシング解析を行います。 | 詳細はこちらをご覧ください。 |
*4 納期は、当社営業日午前中までにサンプルをお受取した場合の標準納期です。解析サンプル数、オプションの有無によって変動する場合がございます。
サンプルについて
- ■ サンプルの状態について
- 純培養株のみが解析可能です。
- 病原性を有する、または有する可能性のある菌体の受け入れは行っておりません。
- お送りいただきましたサンプルは、解析終了後に廃棄いたします。
- サンプルのご返却をご希望の場合は、あらかじめ解析依頼書のサンプル返却希望欄にご記入をお願いします。送料着払いにてご返送いたします。
- サンプルをお送りいただく際の送料は、お客様のご負担となります。
- 以下の場合、サンプル不良と判断し、その時点で解析を完了し、ご報告いたします。
- PCR反応はDNA抽出も含め最大2回まで行いますが、2回目でも産物が得られない場合。
- シークエンシングを2回行っても明瞭な波形が得られず、解析不能塩基数が弊社出荷基準値を上回った場合。
- ■ サンプル及びプレートの名称について
- プレート名及びサンプル名は半角英数字でご記入下さい。
- 「スペース、/、'、"、?、<、>、*、\」は絶対に使用しないで下さい。
納品物
- サービス項目の解析実施内容に応じ、以下の結果を、Eメールにてご報告します。
- 簡易同定結果報告書(PDF形式ファイル)
- 波形データ(AB1形式ファイル)
- テキストデータ(txt形式ファイル)
- 相同性検索結果(Excel形式ファイル)
受託解析サービスのご依頼方法と注意事項について
受託解析サービスのご依頼方法やサンプル送付、納品物に関する注意事項をお知らせいたします。
ご依頼の際は必ずお読みください。
- ■ お問い合わせ先 株式会社日立ソリューションズ @Sales24
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